安捷倫色譜柱要怎么用才是正確的?
瀏覽次數(shù):1546發(fā)布日期:2020-08-24
安捷倫色譜柱是親水相互作用色譜柱,它的保留模式類(lèi)似于正相,并且突破了正相模式的溶劑限制,使用反相系統(tǒng),并且峰在正相序列中。通過(guò)親水相互作用,可以有效地從反相色譜柱中分離出由于保留能力弱而難以分離的強(qiáng)極性化合物。這是一種分離機(jī)制,并且該分離機(jī)制有很多鍵合相,固定相為極性,流動(dòng)相中的水相為強(qiáng)洗脫液,這與傳統(tǒng)的反相色譜法*相反。
1、獲得色譜柱后,請(qǐng)先閱讀手冊(cè),以了解色譜柱的具體性能:溫度耐受性,pH耐受性等,以及色譜柱的洗滌和儲(chǔ)存條件。經(jīng)過(guò)色譜柱校準(zhǔn)測(cè)試后,在確認(rèn)色譜柱本身沒(méi)有問(wèn)題后,色譜柱即可正常使用。
2、樣品應(yīng)進(jìn)行充分預(yù)處理,以確保樣品清潔;應(yīng)使用保護(hù)柱或在線過(guò)濾器,并應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況更換保護(hù)柱芯或過(guò)濾器件。
3、安捷倫色譜柱避免了壓力和溫度的劇烈變化以及任何機(jī)械振動(dòng)。
4、溶劑的組成應(yīng)逐漸變化,尤其是在反相色譜中在流動(dòng)相中使用緩沖鹽時(shí),避免鹽析。
5、應(yīng)選擇合適的流動(dòng)相,以避免破壞固定相,避免pH值低,共價(jià)鍵斷裂,鍵和相水解以及pH值過(guò)高,硅膠溶解。
6、在使用色譜柱的過(guò)程中,如果壓力升高或發(fā)生污染,請(qǐng)選擇適當(dāng)?shù)臎_洗或反沖洗條件。
同時(shí),安捷倫色譜柱與陰離子和陽(yáng)離子的靜電相互作用弱,對(duì)目標(biāo)的選擇性不同;提供氫鍵,分子和靜電吸引的多種作用;可以為強(qiáng)極性目標(biāo)提供適當(dāng)?shù)谋A?;使用水溶性有機(jī)相作為流動(dòng)相可以顯著提高樣品在流動(dòng)相中的溶解度,分離極性和親水性小分子靶標(biāo)和基本藥物分子。