對于不同的分析樣品和檢測需求,安捷倫色譜柱應選擇何種類型的流動相或載氣?
瀏覽次數(shù):11發(fā)布日期:2025-03-07
以下是安捷倫色譜柱在不同分析樣品和檢測需求下,流動相或載氣的選擇建議:
一、液相色譜儀流動相選擇
1、反相色譜:
極性化合物分析:對于極性化合物,如酸性或堿性物質,通常選擇在低pH值下進行分析,以抑制樣品分子的電離,增加其在固定相上的保留。此時,可使用磷酸鹽緩沖液、醋酸鹽緩沖液等作為流動相的一部分,并調節(jié)至合適的pH值(如2-3)。常用的有機溶劑有甲醇、乙腈等,它們與水按一定比例混合構成流動相。例如,分析某些酸性藥物成分時,可能采用0.1%磷酸溶液-乙腈(70:30,v/v)作為流動相。
非極性或弱極性化合物分析:對于這類化合物,一般選擇在高pH值下操作,以減少硅羥基效應,提高分離效果。流動相可以是純水或含有少量有機溶劑(如甲醇、乙腈等),并添加適當?shù)木彌_鹽以維持穩(wěn)定的pH值。例如,分析一些疏水性的天然產(chǎn)物時,可能使用乙腈-水(90:10,v/v)作為流動相。
2、正相色譜:
主要用于分離中等極性和極性較大的化合物,如脂肪酸、脂溶性維生素、甾體激素等。常用的流動相是己烷或庚烷,加入一定比例的極性改性劑,如乙醇、異丙醇、四氫呋喃等,以調節(jié)流動相的極性和洗脫能力。例如,分析某些植物提取物中的脂溶性成分時,可能采用正己烷-異丙醇(95:5,v/v)作為流動相。
3、離子交換色譜:
根據(jù)樣品中離子的性質選擇相應的流動相。對于陽離子交換色譜,流動相通常是酸性水溶液;對于陰離子交換色譜,則使用堿性水溶液。為了改善分離效果和峰形,還可以在流動相中添加適量的有機溶劑。例如,分析蛋白質等生物大分子時,可能根據(jù)蛋白質的等電點選擇合適的緩沖液作為流動相。
4、尺寸排阻色譜:
一般使用水或鹽水系統(tǒng)作為流動相,有時也會添加少量的有機溶劑來改善分離效果。例如,分析多肽或蛋白質的分子量分布時,可能使用磷酸鹽緩沖液-乙腈(60:40,v/v)作為流動相。

二、氣相色譜儀載氣選擇
1、氫氣:
優(yōu)點:具有較低的分子質量和較小的分子尺寸,能夠提供更高的分離效率和更快的分析速度。此外,氫氣的熱導率較高,適用于熱導檢測器(TCD),可獲得較高的靈敏度。
適用場景:適用于對分離效率要求較高、需要快速分析的樣品,如天然氣分析、環(huán)境空氣中的揮發(fā)性有機物分析等。但需要注意的是,氫氣易燃易爆,使用時需特別注意安全。
2、氦氣:
優(yōu)點:化學性質穩(wěn)定,不易與其他物質發(fā)生反應,因此特別適用于需要高靈敏度和穩(wěn)定性的應用,如質譜檢測器(MSD)。
適用場景:廣泛應用于各種復雜樣品的分析,如食品中農(nóng)藥殘留的檢測、藥物代謝動力學研究等。雖然氦氣的分離效率略低于氫氣,但其安全性更高,且能保證電離室的高真空度。
3、氮氣:
優(yōu)點:耗費最少且來源穩(wěn)定,成本相對較低。
適用場景:適用于對分離效率要求不是特別高的常規(guī)分析,如某些工業(yè)生產(chǎn)過程中的質量控制分析、環(huán)境監(jiān)測中的部分項目分析等。但氮氣的黏度較大,可能導致柱前壓較高,因此在使用長色譜柱時需謹慎選擇。
安捷倫色譜柱的流動相或載氣選擇需綜合考慮分析樣品的性質、檢測需求以及實驗條件等因素。正確的選擇不僅能提高色譜分析的準確性和可靠性,還能延長色譜柱的使用壽命。